原发性干燥综合征（primary Sjögren’s Syndrome, pSS）为累及外分泌腺和其他部位或脏器的风湿免疫病，因患者临床表现多样，可首诊于口腔科、眼科、风湿免疫科等科室，目前国内关于pSS的临床特征的分析主要集中于风湿免疫科数据，而本研究着眼于首诊于口腔科的pSS患者抗着丝点蛋白B抗体（anti-Centromere Protein B, anti-CENP-B）阳性的临床特征。本文将对抗CENP-B抗体的靶抗原、抗CENP-B抗体的检测方法、抗CENP-B抗体与pSS的相关性和本团队回顾性分析的抗CENP-B抗体阳性pSS患者临床及实验室特征等内容做一简单介绍。

01 抗CENP-B抗体及其靶抗原

抗CENP-B抗体是抗细胞核总抗体（ANA）的组成成分之一，它的发现与着丝点蛋白的研究紧密相连。着丝点在细胞有丝分裂过程中对染色体的精确分离起着关键作用，一直是细胞生物学和遗传学研究的重点。上世纪80年代，科学家们在研究自身免疫性疾病患者血清中的自身抗体时，逐渐发现了针对细胞着丝点成分的抗体，即抗着丝点抗体（anti-centromere antibody，ACA）^[1]。之后，随着研究的深入，ACA的靶抗原被进一步研究^[2,3]。目前已发现多种ACA靶抗原，包括CENP-A、CENP-B、CENP-C和抗CENP-O等。

在对这些靶抗原的研究过程中，CENP-B在1986年被首次鉴定出来。它是一种高度保守的蛋白质，能特异性地结合到着丝点DNA的特定区域，在细胞分裂时参与染色体的稳定和分离^[4]。随后，针对CENP-B的特异性抗体(抗CENP-B抗体)也被发现。起初，抗CENP-B抗体被认为主要与系统性硬化症（Systemic Sclerosis,SSc）相关，尤其是在局限性硬皮病亚型中，其阳性率较高，成为了该疾病的标志性抗体之一^[5]。

随着对自身免疫性疾病研究的不断拓展，人们发现抗CENP-B抗体并非只存在于SSc患者中，在原发性胆汁性胆管炎（Primary Biliary Cholangitis，PBC）、pSS等疾病患者血清中也能检测到抗CENP-B抗体，这一发现为自身免疫性疾病的研究开辟了新的方向，促使研究者们进一步探索抗CENP-B抗体在不同疾病中的意义和作用机制。

02 抗CENP-B抗体的常见检测方法

目前，检测CENP-B抗体的方法多样，每种方法都有其独特的优势和局限性。

1、免疫印迹法（Immunoblotting）：免疫印迹法是检测CENP-B抗体较为常用的方法之一（可于“ANA谱”等类检验项目中与其他多种特异性抗体同时检测）。它首先将含有CENP-B抗原的细胞提取物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，使不同分子量的蛋白质分离。然后，将分离后的蛋白质转移到固相膜上，再加入患者待检血清孵育固相膜。如果患者血清中含有CENP-B抗体，抗体就会与膜上的CENP-B抗原结合。最后，通过标记的二抗和相应的显色底物来显示结合的抗体，可以对抗体进行定性或半定量检测。这种方法特异性较高，能直观地显示出抗体与特定分子量抗原的结合情况，有助于判断抗体的特异性。但灵敏度相对较低。

2、间接免疫荧光法（Indirect Immunofluorescence，IIF）：间接免疫荧光法以培养细胞（如HEp-2细胞）为底物，测定ACA总抗体，灵敏度较高，但无法直接判定ACA的亚型。

3、酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）：ELISA是基于抗原抗体特异性结合的原理。将纯化的CENP-B抗原包被在酶标板上，加入患者血清，若血清中有CENP-B抗体，抗体就会与包被的抗原结合。然后加入酶标记的二抗，通过酶与底物的反应产生颜色变化，根据颜色深浅来判断抗体的含量。可以相对定量检测抗体。但它的特异性可能受到抗原纯度和交叉反应的影响，在一些情况下可能出现假阳性或假阴性结果^[6]。

随着近几年自身抗体检测方法的发展，如基于化学发光法、多重微球流式荧光免疫技术、磁条码免疫荧光发光法等检测技术亦可以用来检测抗CENP-B抗体。

03 抗CENP-B抗体在原发性干燥综合征（pSS）中的临床和免疫学特征

本团队检索了2016年1月至2022年8月就诊于北京大学口腔医院主诉口干、唾液腺肿大并怀疑pSS的患者共1503例，参照2016 ACR/EULAR pSS诊断标准，排除不符合标准的患者。按照抗CENP-B抗体检测结果分组，最终共纳入pSS患者288例（详见图1）。

备注：SGE：salivary gland enlargement，唾液腺肿大；ACR：American College of Rheumatology,美国风湿病学会；EULAR：European League Against Rheumatism，欧洲抗风湿病联盟

图1 pSS患者筛选及分组流程图

1、患者一般及临床特征资料

在纳入的288例pSS患者中，抗CENP-B抗体阳性组75例，阴性组213例。抗CENP-B抗体阳性组确诊年龄显著高于抗CENP-B抗体阴性组(63 vs 53)；性别无统计学差异；发生唾液腺肿大的比例低于抗CENP-B抗体阴性组(29.3% vs 46.0%)。腺外受累表现方面，共5例pSS患者诊断自身免疫性肝病，其中，抗CENP-B抗体阳性组患者共4例，包括2例PBC和2例自身免疫性肝炎（AIH）患者；抗CENP-B抗体阴性组1例患者诊断AIH。抗CENP-B抗体阳性组罹患自身免疫性肝病的比例高于对照组(5.3% vs 0.5%)。

2、患者自身抗体及其他免疫指标检测结果

在除抗CENP-B抗体以外的其他14种特异性抗核抗体中，抗CENP-B抗体阳性组SSA/Ro60、Ro52、SSB抗体阳性率均低于CENP-B抗体阴性组(48% vs 89.2%), (52.0% vs 83.6%), (13.3% vs 50.7%)，而核小体抗体阳性率较高(8.0% vs 1.4%)。抗CENP-B抗体单阳性组的IgA、TP水平低于合并其他抗体阳性组(IgA: 2.11 g/L vs 2.91 g/L); (TP: 72.6 g/L vs 76.6 g/L)。

抗CENP-B抗体阳性组的血清IgG、RF水平明显低于阴性组(17.90 g/L vs 19.55 g/L, 18.2 IU/ml vs 30.47 IU/ml)，IgM水平高于对照组。二元logistic回归验证结果显示抗CENP-B抗体阳性与IgG水平负相关 [OR = 0.897, 95% CI: (0.850, 0.947)]，与IgM水平存正相关[OR = 1.321, 95% CI: (1.079, 1.618)]。

3、与血清生化指标的相关性

与抗CENP-B抗体阴性组比较，CENP-B抗体阳性组TP水平较低，A/G较高，ALT、AST、ALP、GGT及LDH水平较高。

4、抗CENP-B抗体检测对pSS临床诊断的启示

通过我们以上的研究初步发现抗CENP-B 抗体阳性的pSS患者具有独特的临床和免疫学特征，表现为较少发生唾液腺肿大，血清学TP、IgA检测指标水平较低，但易罹患自身免疫性肝病，肝功能生化指标水平偏高，提示CENP-B抗体可能是pSS亚型分类的特异性标志物。

抗CENP-B抗体的检测对于pSS的临床诊断具有重要的指导意义。因为在2016年美国风湿病学会（ACR）/欧洲抗风湿病联盟（EULAR）发布的pSS诊断标准中，SSA/Ro60抗体是重要的血清免疫学诊断指标之一，CENP-B抗体未被列入诊断指标^[7]。而CENP-B阳性组患者的SSA/Ro60抗体阳性率低，常需要进行病理活检方能够诊断pSS。但是患者病理活检依从性差，这可能导致其在免疫初筛时易被漏诊，因此强调了进行全面免疫学、病理学检查的重要性。

对于疑似pSS的患者，不能仅依据常见抗体的检测结果进行诊断判断。当发现抗CENP-B抗体阳性时，即使其他常见pSS抗体阴性，也不能轻易排除pSS的诊断，而应结合患者的临床表现，如口干、眼干症状，唾液腺、泪腺功能检查，以及唇腺病理活检等进行综合判断，避免漏诊抗CENP-B抗体阳性的pSS患者。免疫学特征上，抗CENP-B抗体对pSS-CENP-B抗体阳性亚型的诊断具有重要影响，此外，抗CENP-B抗体阳性患者血清学指标变化反映了其独特的免疫状态和肝脏功能改变^[8]。

然而，目前的研究仍存在一定局限性，如本研究为回顾性研究，部分指标数据缺失可能造成结果偏倚。未来需要开展更大样本量的前瞻性研究，进一步明确抗CENP-B抗体在自身免疫性疾病中的作用机制，以及其与其他自身抗体、临床指标之间的关系，为临床诊断和治疗提供更可靠的依据。

抗CENP-B抗体在自身免疫性疾病，尤其是pSS和自身免疫性肝病中具有独特的意义。深入研究其在不同疾病中的表现及作用机制，对于提高临床医生对这些疾病的认识，优化诊断和治疗策略具有重要价值，有望为患者带来更好的临床结局。

【参考文献】

[1] Masumoto, H., Masukata, H., Muro, Y., Nozaki, N., & Okazaki, T. (1989). A human centromere antigen (CENP-B) interacts with a short specific sequence in alphoid DNA, a human centromeric satellite. The Journal of cell biology, 109(5), 1963–1973.

[2] Cappelletti, E., Piras, F. M., Biundo, M., Raimondi, E., Nergadze, S. G., & Giulotto, E. (2025). CENP-A/CENP-B uncoupling in the evolutionary reshuffling of centromeres in equids. Genome biology, 26(1), 23.

[3] Nagpal, H., Ali-Ahmad, A., Hirano, Y., Cai, W., Halic, M., Fukagawa, T., Sekulić, N., & Fierz, B. (2023). CENP-A and CENP-B collaborate to create an open centromeric chromatin state. Nature communications, 14(1), 8227.

[4] Parl F. F. (2024). Analysis of CENP-B Boxes as Anchor of Kinetochores in Centromeres of Human Chromosomes. Bioinformatics and biology insights, 18, 11779322241248913.

[5] Favoino, Elvira., Grapsi, Ettore., Barbuti, Giovanna., Liakouli, Vasiliki., & Ruscitti, Piero.. (2023). Systemic sclerosis and primary biliary cholangitis share an antibody population with identical specificity. Clinical and experimental immunology.

[6] Parveen, S., Morshed, S. A., & Nishioka, M. (1995). High prevalence of antibodies to recombinant CENP-B in primary biliary cirrhosis: nuclear immunofluorescence patterns and ELISA reactivities. Journal of gastroenterology and hepatology, 10(4), 438–445.

[7] Shiboski, C. H., Shiboski, S. C., Seror, R., Criswell, L. A., Labetoulle, M., Lietman, T. M., Rasmussen, A., Scofield, H., Vitali, C., Bowman, S. J., Mariette, X., & International Sjögren's Syndrome Criteria Working Group (2017). 2016 American College of Rheumatology/European League Against Rheumatism Classification Criteria for Primary Sjögren's Syndrome: A Consensus and Data-Driven Methodology Involving Three International Patient Cohorts. Arthritis & rheumatology (Hoboken, N.J.), 69(1), 35–45.

[8] 孟彦宏,陈怡帆 & 周培茹.(2023).CENP-B抗体阳性的原发性干燥综合征患者的临床和免疫学特征.北京大学学报(医学版), 55(06),1088-1096.doi:10.19723/j.issn.1671-167X.2023.06.021.

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