冠状动脉微栓塞（CME）是一种非阻塞性的动脉疾病，其成因包括自发性、介入性侵蚀或破裂。该状况通常在经皮冠状动脉介入治疗（PCI）后出现，在受损的物理和生化刺激下局部激活，伴随血小板活化和炎症反应。CME患者可能无明显症状，或可能遭受急性心血管事件，因此CME的成因主要通过尸检来确定。相关研究指出，与斑块破裂相比，斑块侵蚀更易引发CME。破裂斑块主要由以纤维蛋白和红细胞为主的红色血栓构成，而侵蚀斑块则主要由以纤维蛋白和血小板为主的白色血栓构成。

经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention，简称PCI）是一种通过心导管技术，对狭窄或闭塞的冠状动脉进行疏通，以改善心肌血流灌注的医疗手段。在PCI的围手术期，抗血小板药物的使用已成为临床指南的一部分，旨在减少术后血栓形成及并发症的风险。然而，由于血小板活化机制的复杂性以及单靶点治疗可能带来的副作用，该方法的应用受到了一定的限制。鉴于当前抗血小板和溶栓药物存在的局限性，迫切需要开发一种具有高效溶栓能力且副作用较小的多靶点治疗策略。

在中医学中，CME被归类于“胸痹”范畴，芪黄逐瘀方（QHZYF），是江苏省中医院的一种内部制剂，对于动脉粥样硬化及CME的治疗具有一定疗效，并已在临床实践中得到广泛应用。该方剂由黄芪、黄精、苏木、红花和水蛭五种药材组成。

近日，一篇名为“Qihuang Zhuyu formula alleviates coronary microthrombosis by inhibiting PI3K/Akt/αIIbβ3-mediated platelet activation”的文章揭示了QHZYF改善CME的作用机制。

图1 论文首页

研究方法

该研究通过网络药理学分析、分子对接技术以及表面等离子体共振（SPR）方法，预测了QHZYF在调节血小板活化方面的主要活性成分、潜在的治疗靶点以及干预机制。随后，研究对月桂酸钠诱导的CME大鼠模型进行了QHZYF的预处理。通过体内实验评估了大鼠的心功能，并在心脏组织切片上观察了冠状动脉内的微血栓。此外，研究提取了大鼠富血小板血浆（PRP）进行粘附试验，并通过CD62p和PAC-1（ITGB3/ITGA2B）流量测定，以及PRP中血小板相关蛋白表达的测定，进一步分析了血小板的功能。在体外实验中，将HUVECs与PRP共培养，并利用流式细胞术和免疫荧光法对相关基因通路进行了验证。

图2 网络分析图解

研究结果

研究者运用UPLC-Q-TOF/MS技术与数据库挖掘相结合的方法，最终确定了78种化合物作为QHZYF的推测性及代表性化合物，其中75种与CME相关的交叉基因存在关联。QHZYF主要通过调节炎症和血小板的关键途径来预防CME，途径包括脂质和血小板动脉粥样硬化、血小板活化以及PI3K-Akt信号通路等。在筛选出的卡利生、奥罗素A、原皂素A、山奈酚和基因皂苷等5个分子中，结合Lipinski规则进行了分子对接和SPR验证。体内实验结果表明，QHZYF不仅能够改善心肌损伤，还能抑制冠状动脉微血栓的形成。QHZYF通过下调CD62p受体和血小板膜蛋白αIIbβ3的表达来抑制血小板活化，同时降低vWF、钙离子颗粒以及炎症因子IL-6的血小板释放。

经过深入分析，研究发现QHZYF能够通过调节PI3K/Akt信号通路，抑制整合素αIIbβ3的激活。体外实验中，QHZYF能够独立地抑制血小板凝块的收缩。在脂多糖（LPS）诱导后，血小板膜蛋白ITGB3的激活通过PI3K/Akt信号通路被抑制，这揭示了减轻CME形成的一个重要机制。为了验证这一机制，研究使用了PI3K抑制剂LY294002和Akt抑制剂MK-2206。结果表明，QHZYF主要通过调节PI3K/Akt/αIIbβ3信号通路，通过抑制PI3K和Akt的磷酸化，抑制血小板膜蛋白的激活和炎症反应，从而改善CME的情况。

图3 QHZYF抑制血小板凝块回缩及LPS诱导的血小板活化

结论

总之，QHZYF能够抑制血小板的粘附、活化以及炎症反应，从而干扰冠状动脉微血栓的形成，因此在临床抗血小板治疗中显示出显著潜力。

参考文献：

Ding Y, Xiang Q, Zhu P, Fan M, Tong H, Wang M, Cheng S, Yu P, Shi H, Zhang H, Chen X. Qihuang Zhuyu formula alleviates coronary microthrombosis by inhibiting PI3K/Akt/αIIbβ3-mediated platelet activation. Phytomedicine. 2024 Mar;125:155276. doi: 10.1016/j.phymed.2023.155276

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