达雷妥尤单抗（Daratumumab）是一种抗CD38单克隆抗体，是浆细胞骨髓瘤（PCM）的有效疗法。然而，许多初始应答者最终会复发。目前已知的耐药机制包括CD38表达下调、克隆演化和免疫抑制等，但骨髓免疫微环境在耐药中的作用尚不明确。

为了揭示骨髓免疫微环境在耐药中的作用并探索潜在的治疗策略，国内多中心学者开展研究，收集了治疗前和耐药发生时的配对骨髓样本，并研究了这些时间点骨髓免疫生态系统的细胞组成。采用 PrimeFlow RNA 流式细胞仪验证的单细胞 RNA 测序 (scRNA-seq) 和数字空间剖析仪 (DSP) 技术及体内外实验。并在四个外部数据库中验证了获得性耐药标记和 PCM 亚群表型升高的预后作用。研究结果近日发表于《Leukemia》。

研究方法

样本来源：收集6名PCM患者的12对骨髓样本（治疗前和耐药后），进行scRNA-seq和DSP分析。

技术方法：

• scRNA-seq：分析92472个细胞，鉴定7种主要免疫细胞类型。

• DSP：对6对骨髓活检样本进行空间转录组和蛋白质分析。

• 体外实验：验证干扰素-γ（IFN-γ）对MYC的激活作用，以及MYC抑制剂（MYC1975）的逆转耐药效果。

• 小鼠模型：构建MYC过表达的PCM小鼠模型，评估达雷妥尤单抗联合MYC1975的疗效。

数据分析：通过单细胞调控网络推断（SCENIC）和功能富集分析，鉴定关键调控因子和通路。

研究结果

免疫细胞动态变化：

• CD8阳性T细胞：耐药后，具有耗竭表型（如高表达TIGIT、LAG3）和IFN-γ特征的CD8阳性T细胞比例增加。

• NK细胞：具有ADCC功能的CD16阳性NK细胞减少，而抑制性NK细胞（KLRG1阳性）增加。

• 其他细胞：髓系细胞和增殖细胞比例增加，B细胞和CD4阳性T细胞减少。

肿瘤性浆细胞特征：

• 转录变化：耐药后，浆细胞中CD38表达下调，核糖体生物合成和氧化磷酸化通路激活。

• MYC调控：SCENIC分析显示MYC是获得性耐药的关键转录调控因子，其靶基因与耐药相关簇（簇2、5、7、8）高度重合。

空间异质性：

• 肿瘤中心区域的CD45阳性免疫细胞减少，且耗竭标志物（如PD-1/PD-L1）表达升高。

• 边缘区域则表现为干扰素应答性CD8阳性T细胞（ISG15阳性）增加。

体外和体内验证：

 

• IFN-γ的作用：IFN-γ暴露可激活浆细胞中的MYC，导致达雷妥尤单抗耐药。

• MYC抑制剂的逆转效果：MYC1975显著恢复达雷妥尤单抗介导的ADCC和CDC效应，并在小鼠模型中抑制肿瘤生长。

讨论&总结

耐药机制：持续的免疫压力（如IFN-γ释放）激活MYC，驱动浆细胞的代谢重编程和免疫逃逸，导致耐药。

治疗策略：靶向MYC或联合免疫检查点抑制剂（如抗PD-1）可能逆转耐药。

研究意义：骨髓免疫微环境中CD8阳性T细胞和NK细胞的动态变化是达雷妥尤单抗获得性耐药的关键因素。MYC的激活作为核心调控机制，为克服耐药提供了新的治疗靶点。未来研究需进一步验证MYC抑制剂在临床中的应用潜力。

参考文献

Wang, Y., Chen, S., Liang, Z. et al. The bone marrow immune ecosystem shapes daratumumab acquired resistance in plasma cell myeloma. Leukemia (2025). https://doi.org/10.1038/s41375-025-02712-5

Tags： 【Leukemia】中国多中心研究证实MYC调控是浆细胞骨髓瘤对达雷妥尤单抗获得性耐药的关键激活因子