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血小板在动脉血栓形成中起关键作用,传统检测方法如透光聚集测定(LTA)虽被公认为金标准,但因需要消耗大量血液样本且操作复杂,限制了临床、大规模筛查以及珍贵基因工具鼠的检测。
2025年3月5日,上海交通大学医学院附属第九人民医院心内科张俊峰主任、张家毓教授和上海科技大学刘一凡教授团队合作在Journal of Nanobiotechnology上发表了题为“NebulaPlate: a droplet microfluidic platform to analyze platelet aggregation (NebulaPlate:用于分析血小板聚集的液滴微流控平台)”的研究论文,开发一种名为NebulaPlate的微流控平台,该平台可实现对血小板功能的精准、微量、快速检测,为抗血小板药物筛选和精准治疗提供了全新思路。
研究团队首先对液滴生成进行了系统评估,以确保每个微液滴的尺寸和稳定性满足实验要求。在液滴质量得到保证的基础上,研究团队对血小板聚集进行了标准化测定。利用显微镜,对融合后的液滴内血小板聚集过程进行记录。通过比较不同时间点血小板区域与初始状态的变化,建立了血小板聚集的定量评价指标。实验数据显示,在激活剂作用下,血小板聚集于20分钟后进入平台期。利用同一份血小板样本在NebulaPlate与LTA检测,结果呈现出显著相关性(相关系数R2高于0.9),充分验证了该平台在血小板聚集检测中的准确性。
为进一步利用其可视化优势,团队利用NebulaPlate对血小板P-选择素(CD62P)的表达进行实时监测:在药物液滴中添加了特异性标记P-选择素的荧光抗体,通过电晕融合后,利用高分辨率荧光显微镜对液滴内血小板进行扫描,记录P-选择素在血小板膜上的表达变化。数据表明,在thrombin刺激下,P-选择素表达随时间逐渐增加,并在约40分钟后进入平台期。与静息态血小板相比,活化态血小板表面P-选择素的荧光强度显著增强。
综上,该研究成果不仅在血小板功能微量化、高通量检测方面实现了技术突破,也为抗板药物筛选及临床个体化用药策略的评估提供了可能。
该研究由上海交通大学医学院附属第九人民医院心内科张俊峰主任、张家毓教授和上海科技大学刘一凡教授团队合作完成。第九人民医院心内科研究生姜哲轶、魏萌和上海科技大学研究生朱佳伟为共同第一作者,张俊峰主任、刘一凡教授和张家毓教授为共同通讯作者。该工作得到国家自然科学基金、上海市科学技术委员会、上海九院-上科大交叉基金等项目资助。
原文链接:
https://jnanobiotechnology.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12951-025-03212-5
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