寻常型天疱疮（Pemphigus vulgaris， PV）是一种潜在危及生命的自身免疫性皮肤病，其特征是针对参与细胞-细胞粘附和维持表皮完整性的特定桥粒蛋白的明确体液反应。PV自身免疫的标志是在血清和病变皮肤中存在特异性的desmoglin (Dsg)-3和某些情况下的Dsg-1自身抗体。“桥蛋白补偿假说”认为，病变形态（粘膜与粘膜皮肤）可以通过自身抗体模式（分别为抗dsg3与抗dsg3和抗dsg1的组合）来解释，然而，这一理论的有效性最近受到了挑战。人们普遍认为，B细胞激活需要辅助T细胞参与免疫球蛋白（Ig）的产生和类转换。T细胞对Dsg3和/或Dsg1表位的识别似乎是疾病起始的第一步，导致b细胞活化并产生Dsg3/1特异性免疫反应物。

PV与HLA DR4 （DRB1*0402）和DR6 （DQB1*0503）单倍型的紧密遗传关联强调了T细胞参与疾病发病机制的重要性。T细胞在体液免疫反应的开始和成熟中发挥作用，从而连接PV与MHC的关联和自身抗体的产生。当然，这些单倍型也存在于健康个体中。事实上，绝大多数表达HLA DR4 （DRB1*0402）或DR6 （DQB1*0503）基因序列的健康个体不会发展到疾病状态。

为什么携带这些疾病风险因素的健康个体仍然健康仍然是一个谜。虽然PV自身免疫反应的协调和调节尚未完全阐明，但细胞因子和趋化因子可能协调细胞和体液反应之间的相互作用。细胞因子在自身免疫性疾病中作为疾病激活和维持的介质，但也作为疾病缓解和诱导耐受性状态的启动者。它们由免疫级联的各种细胞组分产生并作用于它们，参与效应和调节途径。

有限的尝试已经确定细胞因子和趋化因子表达模式在PV。除了最近发表的一篇文章外，以前的研究通常只在小样本量中使用不同的方法来量化细胞因子浓度。因此，报告的结果是模棱两可的，这也许不足为奇。事实上，在一项研究中，PV中的许多细胞因子被发现上调，而在另一项研究中却被证明没有显著变化甚至下调。表1显示了先前血清细胞因子研究的综合文献综述，特别是哪些研究显示PV患者与健康对照组相比有升高、降低或无显著变化，以及这些数据与本研究的新发现如何比较，将在下面详细讨论。在所有研究中，患者和对照受试者在疾病阶段、临床表型、性别、HLA相关性和治疗方面的异质性可能导致矛盾的结果，这些因素在小样本量中尤其难以解释。

为了克服这些挑战，我们对PV中的血清细胞因子/趋化因子进行了广泛的分析，包括研究的可溶性介质的范围以及分析的患者和对照样本的数量。我们综合比较多种血清细胞因子在确定的PV临床类别。

与以往的研究不同，我们进一步探索了HLA单倍型对患者和对照组中细胞因子环境的贡献，以确定细胞因子在遗传易感但无疾病受试者中的作用。我们利用多重头阵列平台评估了按功能分类的20种细胞因子和趋化因子的表达：1) 116例不同疾病活动期和缓解期PV患者130份血清样本中的促炎因子（IL-1a、IL-1b、IL-6、TNFa）， 2) Th1 (IFNg、IL-2、IL-12), 3) Th2 (IL-4、IL-5、IL-13), 4) Th9 (IL-9), 5) Th17/Th22 (IL-17、IL-21、IL-22、IL-23), 6) Treg （IL-10), 7) NK细胞（IL-15）， 8）趋化因子（IL-8、MCP-1、Eotaxin）。15名携带hpv相关HLA等位基因DRB1*0402和/或DQB1*0503的健康对照（此处称为HLA匹配对照）和14名不携带已知hpv相关HLA等位基因的健康对照（HLA不匹配对照）。

方法：在本研究中，我们对116例PV患者和29名健康对照者的血清样本进行了多重头阵列检测，检测了包括IL-1a、IL-1b、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-15、IL-17、IL-21、IL-22、IL-23、TNFa、IFNg、MCP-1和Eotaxin在内的多种功能类别的细胞因子和趋化因子。

回顾PV患者与对照组相比血清细胞因子水平的文献发现

人口统计数据与HLA相关性

细胞因子谱的广泛变化和患者特异性。热图格式的Z-score转换数据同时显示每个PV患者（n=130）的所有细胞因子浓度。无偏聚类识别细胞因子亚组在个体患者中表达水平相似。某些细胞因子谱的例子被确定为Th2仅（PV292）， Th1仅（PV273）， Th17仅（PV269）， Th1, - 2,17 （PV229）和促炎模式（PV185至190）

PV患者与健康对照组细胞因子/趋化因子水平及组间比较

细胞因子表达谱在PV患者和对照组，hla匹配和hla不匹配。(A)点图描绘了PV患者和对照组（hla匹配和hla不匹配）的细胞因子水平，每个点代表一个单独的样本。每个类别中的水平线代表平均值。p值≤0.05用*表示；p值≤0.005用**表示。(B)热图格式的Z-score转换数据同时显示了每个PV患者（n=130）、hla匹配（n=15）和hla不匹配对照（n=14）的所有细胞因子浓度。细胞因子按功能亚群排列。

细胞因子在疾病活动中的表达谱。点图描绘活动性疾病和缓解期PV患者的细胞因子水平，每个点代表一个个体样本。只有IL-6和TNF-a在活动性PV和缓解性PV患者之间有显著差异。每个类别中的水平线代表平均值。p值≤0.05用*表示

基于疾病活动性的细胞因子/趋化因子水平和组间比较

细胞因子表达谱与疾病形态和性别的关系。(A)点图描绘了活动性疾病患者中具有粘膜或粘膜皮肤形态(A)的PV患者的细胞因子水平，以及无论疾病状态如何的PV患者的男女差异(B)，每个点代表一个单独的样本。(A)与活动性粘膜病变患者相比，伴有活动性粘膜病变的PV患者IL-9和IL-13水平显著升高。(B)男性患者IL-13和Eotaxin水平明显高于女性患者。细胞因子在这些比较中没有显示出显著差异。每个类别中的水平线代表平均值。p值≤0.05用*表示。

Tags： Front Immunol：寻常型天疱疮患者和遗传易感健康对照中HLA相关Th2和Th17驱动的免疫激活研究