今天一实习生问我,“为什么溶血标本会被拒收?”我回答说:“溶血会干扰许多检验项目的反应,造成错误的结果。”又问:“咱们生化哪些项目会受影响?”又追问:“怎样才能避免标本溶血?所有的溶血标本都拒收吗?”。现对有关生化项目溶血标本的问题一一解答。

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为什么溶血标本会被拒收?

标本溶血是临床生化检验中最常见的一种干扰和影响因素。溶血后对多数的生化反应会产生影响,导致检验结果不准确,不能客观真实地反映患者当时的身体状况。

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生化那些项目会受影响和其影响机理?

结果偏高的项目

(1)天冬氨酸氨基转移酶(AST): 红细胞内的AST含量比血浆中的AST高出近40倍,故溶血时AST可升高。

(2)丙氨酸氨基转移酶(ALT):红细胞中的ALT比血浆中的含量要多7倍左右,因此,溶血后ALT也可上升,对比AST可知,溶血对该指标的影响较小。

(3)乳酸脱氢酶(LDH)和α-氢丁酸脱羧酶(α-HBDH):红细胞内LDH含量较血清中LDH高180倍,即使较小的溶血都会导致结果偏高。LDH活力基本通过α-HBDH体现,溶血时二者会同步升高。

(4)磷酸肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK—MB):红细胞存在腺苷酸激醇(AK)对三磷酸肌酸和二磷酸腺苷(ADP)生成肌酸和三磷酸腺苷(ATP)的反应有催化效应,在反应过程中生成的ATP会增加CK活性,进而引起结果偏高。同样同工酶CK—MB也会升高。

(5)钾(K):红细胞中钾离子的浓度比血浆中高30多倍,溶血后K会升高很明显。

(6)总蛋白(TP):一般选择双缩脲法来测定,测量的主波长为540nm。血红蛋白的吸收峰在555nm处。当红细胞发生溶血破裂后,很多血红蛋白会进入到血清中,从而引起测量值偏高。

(7)胆碱酯酶(CHE):溶血时在红细胞内的真性CHE逸出,致使测定血清的CHE结果假性增高。

结果偏低的项目

(1)γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT):当标本溶血时,会引起γ-GT活性下降,从而引起测定结果下降。

(2)碱性磷酸酶(ALP):同样标本溶血将导致ALP活性下降,造成假性ALP水平降低。

(3)血糖(GLU):为标本溶血后血清被稀释以及红细胞破裂后释放的还原性辅酶中和了反应过程中部分中间产物 H2O2,使得反应的最终产物醌式染料的浓度降低,两方面影响因素综合导致Glu测定值偏低。

图1为患者标本溶血的化验结果,图2为同一患者当天发现标本溶血后重新抽血,未发生溶血的标本的化验结果。由以下两张图片可以看出溶血前后AST、LDH、α-HBDH、CK、CK—MB、TP和CHE均明显升高,K和ALT为发现明显升高,ALP和γ-GT没有明显变化。这可能与标本溶血程度有关。

图1

图2

标本溶血影响生化反应项目机理同时存在并可相互作用,而使受影响的检验项目更为复杂化,因此,严控标本溶血是保证检验质量的重要方面。

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怎样避免标本溶血?

获得一个非溶血的样本是由很多因素共同决定的。收集标本时尽可能让血液从血管到试管顺畅流动。用注射器抽血时应用很小的力使血液吸到针筒中。注射器的针头合适时,注射器活塞轻轻向后拉可以控制血液缓慢流入针筒。注射器向试管注入血液时也是相同的过程。真空采血管因维持合适的压力,较注射器采血要好。除此之外还应掌握标本的运输、保存、离心、分离上清的条件和方法。

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生化标本常见溶血的原因有:

1、注射器或容器内不干净。

2、抽血时使用的针头过小、抽血用力过大、较长时间地使用止血带、产生过多的泡沫。扎止血带时不宜过紧,且不能超过1分钟。

3、抽血后未取下针头直接将血液注入容器内。

4、离心时玻璃管破碎等等。

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实验室如何检验样本是否溶血?

目前的检测条件下,全自动生化分析仪可以快速可靠地自动检测溶血指标,通过样本的溶血指数确定溶血程度,并把检测的结果传输到LIS系统。

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溶血到什么时候才算溶血?我们怎么处理?

生化试剂的厂家针对不同的试剂会提供关于血红蛋白浓度对检验项目产生干扰的说明,但却没有指出溢出的血红蛋白量与结果改变的相关性。这就需要我们在实际工作中,除非万不得已,尽量不要采用溶血标本。如果非用不可,也必须在报告单上注明标本溶血,并标示溶血程度并做好和临床医生之间的沟通。 

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并不是所有的溶血标本都拒收

直接拒收溶血样本时,一定要谨慎,因为有些溶血不是由于人为原因造成的体外溶血,而是由患者本身疾病造成体内溶血。比如遗传性球形红细胞增多症、G-6-PD缺乏症、地中海贫血/海洋性贫血、自身免疫性溶血性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿病人的血会出现体内溶血。这样的患者也需要做生化检查,我们要和临床医生充分沟通好,在化验单上标明溶血程度并发出检验报告。

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