编者按

第75届美国肝病研究学会年会（AASLD 2024）于当地时间2024年11月15日 - 18日在美国圣地亚哥举行，肝霖君与您分享相关重要内容。

共价闭合环状DNA（cccDNA）清除是慢乙肝临床治愈的难点，cccDNA在肝细胞增殖的情况下被稀释。既往研究表明HBV感染与肝脏中双核多倍体比例的增加密切相关。相比二倍体肝细胞，多倍体肝细胞的增殖速度较慢，这可能会维持病毒感染，其确切机制仍有待阐明。

中山大学附属第三医院的高志良教授、林炳亮教授团队在AASLD 2024大会摘要中公布的一项研究显示：HBV通过下调HDAC6促进肝细胞双核多倍体形成，维持cccDNA库的稳定性，从而促进病毒复制。

研究方法

检测不同疾病阶段的慢乙肝患者（n = 120）和健康对照组（n = 10）的双核肝细胞比例和cccDNA水平。HepG2、Huh7、HepG2.2.15、NTCP-hepG2和HepAD38细胞系用于机制验证。采用RT-qPCR和Western Blot检测靶基因的表达水平。采用流式细胞分析技术和EDU染色等方法检测肝细胞倍性和细胞增殖水平。

研究结果

血清HBV DNA载量和HBsAg水平越高，慢乙肝患者肝内双核多倍体的比例越高。经抗病毒治疗后，肝内双核多倍体的比例逐渐降低，肝内cccDNA水平下降。HBV会显著上调肝细胞多倍体的比例，并下调与增殖相关的基因组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）的水平。血清HBsAg水平越低，肝脏中HDAC6的表达水平越高，肝脏中双核多倍体的比例与HDAC6表达水平呈负相关。HDAC6过表达可显著促进肝细胞增殖，降低肝细胞多倍体的比例。直接参与下调HDAC6表达的是HBV DNA水平，而不是HBV相关抗原，如HBsAg（大、中、小表面蛋白）、HBeAg、HBx和HBcAg。HBV DNA通过上调HDAC6的转录抑制因子SP5从而抑制HDAC6转录，在HBV DNA抑制后，SP5表达下调。

HBV会显著上调抑制细胞质分裂的两个基因E2F7/8，从而促进双核肝细胞的形成，HDAC6过表达后E2F7/8水平下降。HDAC6和SMC6的表达水平呈正相关，肝细胞多倍体的测序数据显示，随着肝细胞核倍性的增加，HDAC6和SMC6的表达水平逐渐下降。HDAC6过表达可降低Hep AD38细胞的cccDNA水平，并通过上调SMC6水平抑制cccDNA转录。

HBV调控肝细胞双核多倍体的机制示意图

研究结论

HBV通过下调HDAC6促进肝细胞双核多倍体形成，维持cccDNA库的稳定性，从而促进病毒复制。

肝霖君有话说：

HBV感染主要是机体免疫功能调节障碍所导致，既往研究表明溶酶体相关膜蛋白3（LAMP3）与HBV感染相关，并且LAMP3表达增加与HBV感染引起的肝功能异常呈正相关。在本研究中，HDAC6表达与肝细胞双核多倍体的比例呈负相关。经抗病毒治疗后，肝细胞双核多倍体的比例逐渐降低，cccDNA水平下降。未来可进一步探索HBV感染相关机制，以优化HBV治疗策略，提升临床治愈率。

参考文献：

Wu LL, Yu HY, Gao ZL, et al. HBV Promotes Hepatocyte Binucleated Polyploid Formation Through Down-Regulation Of HDAC6 To Maintain The Stability Of The cccDNA Pool And Promote Viral Replication [J]. AASLD2024, Abstracts (263).

Tags： 【AASLD2024速递】高志良教授团队：HBV感染机制探索