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标本类型:
诺如病毒的检查方法,一般不需要抽血化验,通常是通过便常规、呕吐物等这些标本进行检测。
主要的检测方法有以下几种:
第一种,首选的粪便标本,沾取粪便5克(黄豆大小)以上置于清洁、无菌、干燥的密闭容器内等待检测。
第二种,肛拭子,这些适合于患者考虑是诺如病毒感染而没有粪便的,或者说排不出粪便的,就需要借助于肛拭子采取粪便。肛拭子的检出率是低于粪便标本的,并且比较容易出现假阴性,因此在临床中使用了几率相对较少,尽量是让患者自行留取粪便进行送检。
第三种,呕吐物,采集呕吐物5克以上,置于清洁、无菌、干燥的密闭容器内等待送检。
第四种,水,如果怀疑诺如病毒是水源性污染爆发的时候,可以采集1升以上的水样进行检测。
第五种,食品,但是因为食品成分比较复杂,病毒含量也比较低,所以比较难以提取诺如病毒,在临床当中应用的比较少。
还有一种是环境涂抹采样,像厨房、厕所、门把手、玩具等,用无菌拭子涂抹表面之后,挤入到缓冲液当中去送检,这些标本都可以检测出来诺如病毒。
✍️标本采集要求:
发病3天内的粪便,带便肛拭子或者呕吐物标本,粪便标本应在发病首日采集,至多不能超过发病急性期(48~72h),此时为稀、软便,病毒排出量最多。肛拭子用采样棉签蘸生理盐水或病毒保存液、或PBS液后,插入肛门4-5cm(幼儿2-3cm)处,轻轻旋转擦取直肠表面带便粘液,置于含病毒保存液的采样管中,病人呕吐物是粪便标本的最佳补充,有助于病原的诊断。该标本的采集、储存和运送条件同于粪便。从流行病学角度出发,在水、食物或其它外环境标本中检出诺如意义重要。需注意检测技术要锁定在高度怀疑的传播媒介上,尽早采样并置4℃存放,若是饮用水,需用大容量(5~100L)浓集病毒后检测。
粪便:首选样本类型。若为水样便,采集1-5mL;若为成形便,采集 5g左右,将样本置于清洁、无菌、干燥的密闭容器内严格密封送检。
肛拭子或呕吐物标本:采集后放在含有无菌PBS缓冲液或Hank’s液的采样管中,尽快送检。
✍️实验室检测方法:
目前常用的实验室检测方法为胶体金法和分子生物学方法。
(1)胶体金法
可检测人粪便中诺如病毒的GI和GII型抗原的定性检测。此方法操作简便、灵敏度较高,只需5-15分钟,就可快速检测出是否感染了诺如病毒。
(2)分子生物学方法
逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)能检测出低浓度GI、GII和GIV三个致病型的诺如病毒感染,该方法灵敏度高,特异性强。
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