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霍乱弧菌实验室检查方法
01 革兰染色
取粪便或早期培养物涂片作革兰染色镜检,可见革兰阴性稍弯曲的弧菌。
02 悬滴镜检
将新鲜粪便作悬滴镜检,可见运动活泼呈穿梭状的弧菌。
03 制动试验
取急性期患者水样粪便或碱性胨水增菌培养6小时表层生长物镜检,观察动力。
如有穿梭样运动物时,则加入O1群多价血清一滴,若是O1群霍乱弧菌,由于抗原抗体作用,则凝集成块,弧菌运动即停止。若加入O1群血清,不能制止运动,再用O139血清重作试验。
04 分离培养
常用硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)、4号琼脂或庆大霉素琼脂平板。在TCBS上形成黄色菌落,4号琼脂或庆大霉素琼脂平板呈灰黑色中心的菌落均为可疑菌落。选择可疑菌落,应用O1群及O139群霍乱弧菌抗血清作玻片凝集试验。
05 PCR
PCR产物中的霍乱弧菌toxR基因和毒素基因亚单位(CtxA)和毒素协同菌毛基因(TcpA)可用来区别霍乱菌株和非霍乱弧菌。
06 质谱仪(MS)
MS可根据霍乱弧菌核糖体蛋白指纹图谱的特异性进行细菌鉴定。
07 病原宏基因组新一代测序(mNGS)
mNGS可直接对样本中的核酸进行高通量测序,快速、客观的检测临床样本中的病原微生物,具有时效性强、灵敏度高等优势。
附:霍乱预防办法
1、饭前、便后和加工食物前要用流动的水和肥皂/洗手液洗手。
2、喝开水,不喝生水,不使用不洁的水漱口、刷牙、洗食具、洗水果、洗蔬菜和其他食品。
3、不吃生的食物,食品在吃前要煮熟、煮透。尽量少食用易带致病菌的食物,如螺蛳、贝壳、螃蟹等水海产品;吃剩饭菜要放在冰箱储存,不要吃未在冰箱储存或储存时间较长的食物,隔夜食物吃前一定要彻底加热,没条件储存、加热的请勿食用。
4、生吃瓜果蔬菜要洗净,先用清水浸泡,然后使用流水多次冲洗;一些带叶、带根的蔬菜,要特别注意根部的清洗。
5、尽量不要在路边摊或卫生条件差的餐馆进餐,在外就餐少吃凉拌菜和肉类烧烤食物。
6、尽量减少与腹泻病人的接触,特别是不要共用餐具。
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