前 言

支原体是一类无细胞壁，可通过细胞滤器，能在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物，因能形成有分支的长丝，故称为支原体。目前对人致病的有肺炎支原体、人型支原体、解脲脲原体、生殖道支原体和穿通支原体，其中解脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）是人类泌尿生殖系统常见的寄生菌之一，因其具有分解尿素的特性而得名，Uu主要引起人体泌尿生殖系统的感染，如急性尿道综合征、非淋球菌性尿道炎，也可引起不孕不育症、肾盂肾炎、阴道炎和盆腔炎等。

案例经过

又是忙碌的上午，正埋头筛平板中，同学拿着一个标本走过来问到，“老师，这个门诊患者的医嘱是解脲脲原体的培养，但是送来的是精液标本，这个可以做吗？怎么做呢？”同学的疑惑是可以理解的，因为以往我们收到的标本类型多为泌尿生殖道分泌物，精液标本进行支原体培养确实少。由于精液液化前无法进行下一步操作，因此马上将标本放入37℃水浴箱中，每隔10分钟观察一次是否液化，待液化后按照标准操作规程接种至固体、液体培养基进行培养。

培养24小时后，液体培养基的阳性对照孔及Uu孔由淡黄色变为红色，固体培养基上可见针尖大小的菌落，低倍镜下可见棕褐色、边缘规则、近正圆形的菌落，菌落中央隐约可见一个小圆核，菌落形态似Uu。

继续培养至48小时，固体培养基变为淡红色，肉眼可见菌落增大至100-200um，低倍镜下观察菌落形态如图1所示，高度怀疑为Uu，但由于既往未从精液中培养出Uu，对精液中的Uu在固体培养基上的菌落形态还不能准确把握；其次，固体培养基中虽添加了抑菌剂，但并不能抑制所有细菌生长，为排除杂菌造成的假阳性，我们将固体培养基上的单个菌落分别进行了：①涂片、革兰染色；②采用MALDI-TOF MS进行鉴定。

图1 Uu经48h培养的菌落形态（10×10，精液标本）

该菌落经革兰染色后，镜下未找到典型细菌结构，我们知道Uu无细胞壁，革兰染色不易着色，因此在直接镜检中很难被发现，这从侧面印证Uu的可能性大；但质谱仪鉴定失败，究其原因可能是我们的质谱数据库不包含Uu。如果能有其他的方法加以佐证，准确地发出Uu阳性的报告岂不是更完美？

本着“检以求真，验以求实”的初心，立即与临床医生进行了沟通，临床告知这个患者在门诊要求进行支原体相关检查，但不愿取尿道口分泌物进行培养，无奈之下选择了采集精液进行送检。

抱着试一试的想法，我们拨通了患者电话，询问其是否方便重新取一份尿道口分泌物进行培养（不收费），患者次日来院采集了一份尿道口拭子，经培养低倍镜下可见典型的海胆样Uu菌落（图2），菌落中可见明显的细小颗粒。至此，心里悬着的石头终于落地。

图2 Uu经48h培养的菌落形态（10×10，尿道口拭子标本）

案例分析

Uu相关实验室检测方法包括培养、金标法和PCR等，培养法包括固体培养法和液体培养法。固体培养可通过镜下观察菌落典型特征准确判断为Uu，液体培养还可同时进行药敏试验，其原理为Uu分解尿素产氨，改变PH值使液体由黄色变为红色，因此不能避免其他可分解尿素的杂菌导致的假阳性，有文献报道液体培养基的假阳性率高达20%。目前大多数实验室采用固体联合液体培养法检测Uu，既可提高检测的灵敏度，又能降低单纯采用液体培养法导致的高假阳性。

Uu菌落存在多形性，包括海胆型、油煎蛋型、空泡型和微小型等不同形态，其中以海胆型最为常见。菌落形态的异质性可能与不同菌株的生化反应、生长特性有关。此外，不同的采集时机，如抗生素使用前、后，不同标本类型因支原体寄生的环境生物学不同，也可导致菌落的多形性。

有研究表明，患者在用药后复诊时取尿道分泌物和前列腺标本不能准确反映泌尿生殖道支原体感染的真实状态，可选择采集精液标本进行支原体培养。在用药方面，支原体因缺乏细胞壁，因此对作用于细胞壁的抗生素无效，如β-内酰胺类、糖肽类等，其常用的抗菌药物包括大环内酯类、四环素类及喹诺酮类。临床经验性用药针对性较低，培养和敏感药物治疗是诊治的有效方法。

总 结

在日常工作中，我们常见的是泌尿生殖道分泌物培养的Uu菌落，精液标本中的Uu菌落少见，两者在镜下的形态确有不同之处。通过这个案例，我们深刻认识到了Uu菌落的多形性，这也警示我们一定要多看多学多思考。形态学是检验人员的基本功，一定要不断地提升这项技能。

参考文献

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