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现有HCV检测方法
丙型肝炎病毒(HCV)是危害肝脏的主要病毒之一,造成严重的公共卫生问题。目前常用的HCV检测方法有血清学检测和分子生物学检测(HCV-RNA检测),血清学检测又可分为HCV核心抗原(HCV-cAg)检测和HCV抗体(HCV-Ab)检测。
HCV-Ab检测
HCV-Ab是机体由于HCV的刺激而产生的蛋白质,HCV-Ab检测是一种间接检测,也是目前最常用于HCV临床筛查的检测方法之一,但存在一些不足:窗口期长,易发生漏诊;无法区分现症感染和既往感染;免疫缺陷症患者可能会出现假阴性结果; 在HCV-Ab抗体水平极低的人群中,HCV-Ab检测会出现比较高的假阳性几率[1]。因此往往需要通过其他检测方法来进一步确认检测结果。
HCV-RNA检测
临床指南通常建议在HCV-Ab检测结果阳性后进行HCV-RNA检测。HCV-RNA检测特异性高、窗口期短,能够直接反映HCV在体内的积累水平,通常作为丙型肝炎早期诊断和预后的金标准,为HCV病人的病情诊断和治疗监测提供依据。但是,由于免疫反应对病毒复制的抑制,非病毒血症期患者体内的HCV-RNA可能暂时无法检测到,出现HCV-RNA检测阴性而HCV-Ab检测阳性的情况[2],可能导致漏诊。除此之外,HCV-RNA检测对样本储存条件、实验设备和操作人员素质均有严格要求,检测成本也相对较高。
HCV-cAg检测
在外周血中,HCV-cAg是HCV病毒颗粒的结构蛋白,结构蛋白在HCV各亚型中高度保守,是理想的HCV感染标志物。HCV-cAg可用于区分既往感染与现症感染,还可用于监测抗病毒疗效和预测持续病毒学应答反应。有学者认为,HCV-cAg检测作为HCV-RNA检测的替代方案,有望在HCV防治中发挥重要作用[3],其原因是HCV-cAg表达与HCV-RNA高度相关。
俄罗斯科学家Karen K. Kyuregyan对2027名志愿者进行了HCV检测,从其中16名阳性患者的检测结果来看,HCV-cAg与HCV-RNA的检测结果完全一致,且HCV-cAg与HCV-RNA定量测定结果表明二者相关性良好[4]。R2= 0.84(R是线性相关系数,R2值越接近1则拟合度越好),p < 0.005(P是检验样置信度的指标,p≤0.05时模型的结果可靠)。
图1. HCV-cAg和HCV-RNA浓度之间的相关性
Karen的实验结果阳性样本较少,而土耳其科学家Recep Kesli的实验结果则更具说服力。他的实验测定了154名患者的HCV-cAg与HCV-RNA积累量,同样得出了良好的线性关系(r=0.864;P = 0.0001)。HCV-cAg检测发现的154例阳性受试者HCV-RNA检测也为阳性,结果完全一致[5]。目前,用于诊断目的的 HCV-RNA 和 HCV-cAg 的等效性研究项目也已获得欧洲肝脏研究协会 (EASL) 批准[6]。
图2. HCV-cAg和HCV-RNA浓度之间的相关性
HCV-cAg检测应用前景
缩短窗口期
从检测“窗口期”上看,HCV-Ab检测窗口期最长,约70天;HCV-RNA检测窗口期最短,两周左右即可检测到HCV-RNA。HCV-cAg与HCV-RNA几乎同时出现,窗口期稍滞后于HCV-RNA检测,但与HCV-Ab检测相比可使窗口期缩短5~7周[3]。
图3. HCV感染标志物的出现时间
适用于免疫缺陷患者
HCV-Ab检测方法对于免疫缺陷患者不适用, 因此需要进行HCV-cAg检测或HCV-RNA检测才能进行最终结果判定。两种方法相比较,HCV-cAg检测省时省工,且效果同样好,Fiona V.Cresswell的研究表明,与HCV-RNA检测相比,HCV-cAg检测可达100%灵敏度和97.9%特异性[7]。
可用于监测抗病毒治疗过程
为了评估 HCV-cAg检测在接受DAA治疗的HCV感染患者中的诊断有效性,研究人员分析了来自28名患者的103个样本。与RT-PCR相比,HCV-cAg检测的灵敏度和特异性分别为96.2%和100%,表明HCV-cAg是接受DAAs治疗的HCV感染患者随访的可靠标志物[8]。
区分既往感染与现症感染
HCV-cAg检测和HCV-Ab检测联合可以区分既往感染和现症感染,有学者提出,HCV-cAg检测可能是HCV筛查的一个重要组成部分,能够实现早期诊断与护理治疗的有机结合[9]。
节约成本
研究表明,引入HCV-cAg检测后,丙肝检测成本约减少47.90%[10]。此外,HCV-cAg检测所需时间成本也有所减少。WHO还通过了在急性HCV检测中用HCV-cAg检测代替HCV-RNA检测的相关文件[11]。与HCV-RNA检测相比较,HCV-cAg检测的另一个显著优势是它可以使用与HCV-Ab相同的设备仪器开展实验,节省了额外购置设备和建设实验室的成本[12]。
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