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背景及目的:乙肝是由乙肝病毒引起的一种严重的肝脏感染,仍然是一个需要紧急应对的全球公共卫生问题。乙肝病毒感染可以是慢性的,并显著增加发展为肝硬变(LC)、肝细胞癌(HCC)甚至死亡的风险。乙肝病毒血清标志物的检测是诊断乙肝病毒感染、确定感染分期的有效方法。
慢性乙肝病毒感染的典型血清学模式是存在循环中的乙肝表面抗原(HBs Ag)。与显性感染不同,隐匿性乙肝病毒感染(OBI)是乙肝病毒感染中的一种特殊状态,它的定义是在现有的检测方法中,乙肝表面抗原阴性患者的肝脏中存在具有复制能力的HBVDNA和/或血液中存在HBVDNA。因此,所用测试的灵敏度会影响识别OBI的程度。由于肝活检的侵袭性,临床上常采用无HBs Ag的循环HBVdna,结合随诊来鉴别OBI。
根据血清学结果,OBI可分为血清阳性OBI和血清阴性OBI,前者代表乙肝核心抗体(抗-HBc)和/或乙肝表面抗原抗体(抗-HBs)阳性,后者代表抗-HBc和抗-HBs均缺失。在大多数OBI患者中,乙肝病毒复制活动通常处于休眠状态,但某些未检测到的乙肝表面抗原是由S-eacape突变引起的除外。然而,我们确定了一小部分OBI献血者的HBeAg阳性,HBeAg是活跃的乙肝病毒复制的标志。HBs Ag阴性似乎与HBeAg阳性代表的病毒的活跃复制状态相矛盾,并可能导致临床忽视这些个体,影响他们的诊断、治疗和预后。
在本研究中,我们确定了10名从未接受过抗病毒治疗的HBs Ag-/抗-HBs+/HBeAg+血清学模式的OBI献血者。用Lumipulse HBs-HQ法从血浆中的循环免疫复合体(CICs)中分离和检测出HBs Ag,发现未检出的HBs Ag主要是由形成的HBs Ag-CICs引起的。通过对HBs Ag编码区的测序,还发现了受宿主免疫系统影响的HBs Ag变异,这也可能与未检测到的HBs Ag有关。这项研究突出了OBI的一种不寻常的感染状态,这有助于深入了解病毒与宿主相互作用在乙肝病毒感染中的复杂性和多样性。同时,临床应对这些个体给予更多的关注,以避免疾病的进展。
方法:收集2015~2018年中国地区16个省、市、自治区初筛HBVDNA阳性和HBSAg阴性献血员血浆标本2022份。用Cobas Taqcreen MPX试验和Architect HBs Ag定量II法重新检测这些样本中的HBVDNA和HBs Ag。采用Lumipulse-HBs-HQ法和聚乙二醇法(PEG二次沉淀法)检测抗-HBs循环免疫复合物(CICs)中的HBs Ag。
结果:2022份标本中,Cobas-HBVDNA检测阳性1487份,Architect-HBs Ag检测无反应,Lumipulse-HBs-HQ法阳性404份。进一步分离HBs-/抗-HBs+/HBeAg+OBI献血员标本,7例检出HBs-CICs。序列分析表明,D44N、N98T、G73S、Del 56-116和I161T存在于前S区,S区存在P127T、F134L、G145R、V168A和I126T/S等免疫逃逸突变。
图1初步筛选出HBVDNA呈反应性和无反应性的2022份样本的地理分布。星号代表经过建筑师试剂测试的HBs-/抗-HBs+/HBeAg+样本(原始地图来自国家公共地理空间信息服务平台的地图世界)。
表1 10份HBs-/抗-HBs+/HBeAg+样本的HBs-CICs检测。
表2 四份B型HBs-/抗-HBs+/HBeAg+样本常见病毒变异情况摘要
表3 6份C型HBs-/抗-HBs+/HBeAg+样本常见病毒变异情况摘要
图2 在HBs Ag-/抗-HBs+/HBeAg+样本中未检出的HBs Ag与循环免疫复合物(CICs)和HBs Ag变异体有关。
结论:OBI献血员中存在少数HBs-/抗-HBs+/HBeAg+个体。这些个体中未检出的HBs主要是由于HBs Ag-CICs。在宿主的选择压力下,免疫逃逸相关突变也会发生。建议采用HBs Ag分离法或Lumipulse HBs Ag-HQ法进行鉴别。
原文出处:
Yan Y, Sun H, Chang L, et al.Circulating immune complexes and mutations of HBsAg are associated with the undetectable HBsAg in anti-HBs and HBeAg positive occult hepatitis B virus infection.Front Microbiol 2022;13
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