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膀胱癌(BC)是总体上第六大最常见的癌症。血尿是BC最常见的症状之一,占所有泌尿科就诊的20%。然而,只有10%的大血尿患者和2%至5%的显微血尿患者被诊断为BC。目前的指南建议对几乎所有血尿患者进行膀胱镜检查和成像检查,以初步诊断BC。
膀胱镜目前是一种黄金标准的诊断工具,但由于对早期BC的敏感性不足和不愉快,由于其侵入性和费用,其局限性。尿细胞学是一种非侵入性方法,广泛用于检测BC作为膀胱镜检查的辅助剂。然而,它的灵敏度范围也不足,为20%至50%,特别是在检测低等级(LG)BC时。一个主要挑战是开发准确的无创测试,以有效检测出现血尿患者的原发性BC。美国食品药品监督管理局批准了几种基于尿液的生物标志物检测方法,如BTA、NMP22和UroVysion来诊断BC。然而,这些标志物在初始诊断中检测BC方面受到限制,因为它们的敏感性低,假阳性率高。
异常DNA甲基化是灭活肿瘤抑制剂或癌症相关基因的主要表观遗传机制,已知是肿瘤发生过程中高度频繁的分子改变,并已被作为潜在的癌症生物标志物候选药物进行研究。先前的研究表明,检测尿液中的异常DNA甲基化是早期检测和监测BC.存在多个甲基化位点的生物标志物面板或与尿液样本中遗传突变相结合的各种测试表明检测BC的潜力。最近,膀胱 EpiCheck测试,该测试利用了15个DNA甲基化生物标志物组成的面板使用尿液DNA监测BC复发,已开发并纳入欧洲泌尿外科协会临床实践指南。
研究确定了异常的PENK甲基化,并发现尿液中的PENK甲基化测试可以使用定量甲基化特异性实时PCR(qMSP)来区分BC患者和健康受试者。其他研究还表明,分析尿液样本中的PENK甲基化与多个其他甲基化标记相结合是检测BC.的潜在非侵入性方法。尽管如此,在临床实践中,基于尿液的生物标志物测试应该足够敏感和准确,特别是用于检测BC早期存在的微量生物标志物。
线性目标富集(LTE)/qMSP检测,使用传统qMSP之前甲基化目标线性放大的初始步骤,导致检测甲基化生物标志物的高灵敏度。2023年6月15日发表在JOURNAL OF MOLECULAR DIAGNOSTICS的的目标是应用LTE/qMSP方法来测量尿液DNA中的PENK甲基化目标(mePENK-LTE/qMSP),并验证其检测血尿患者BC的诊断能力。
前瞻性研究的注册流程图
对于这项研究,研究人员分别设立了两项独立研究,一项是培训集的回顾性病例对照研究,一项是验证集的前瞻性研究。对于病例对照研究,研究人员使用了2012年5月至2016年10月期间在韩国忠南国立大学医院收集的BC患者(n = 175)和非BC患者(n = 143)的无效尿液样本。病例对照研究是作为培训集进行的,并在该点确定了mePENK-LTE/qMSP测试的临界值,以最佳方式区分所有BC患者和没有BC的患者。
在病例对照研究中,尿液DNA中使用线性靶富集的PENK甲基化结果,然后进行定量甲基化特异性PCR测试
血尿仍然是BC最常见的初始症状。然而,只有一小部分血尿患者被诊断为BC,从5%到20%不等。目前的临床指南尚不建议使用非侵入性诊断工具对血尿患者进行膀胱镜检查进行分类,这被认为是金标准,但却是BC诊断的侵入性程序。缺乏有效的分诊工具可能会导致BC.的诊断延迟和预后不良。因此,迫切需要准确的非侵入性诊断来识别血尿患者的BC,并促进及时转诊膀胱镜检查。
综上所述,LTE/qMSP对尿液DNA中PENK甲基化的测试提供了很高的分析灵敏度和鲁棒性。前瞻性研究中的测试性能表明,在血尿患者中检测BC的潜力很大。因此,这种方法可以减少不必要的侵入性膀胱镜检查的数量,并减轻经济负担。
原文出处
Oh TJ, Lee JY, Seo Y, Woo MA, Lim JS, Na YG, Song KH, Bang BR, Lee JJ, Shin JH, An S. Evaluation of Sensitive Urine DNA-Based PENK Methylation Test for Detecting Bladder Cancer in Patients with Hematuria. J Mol Diagn. 2023 Sep;25(9):646-654. doi: 10.1016/j.jmoldx.2023.05.003. Epub 2023 Jun 15.
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