代谢性心肌病是一种慢性代谢性障碍，主要特征为甘油三酯的累积和脂质毒性造成的组织损伤。其病理机制主要与胰岛素抵抗和代谢特征的改变有关，具体表现为脂肪心肥大、左心室心肌肥厚、心肌结构的不良重塑、心肌组织中脂质沉积和细胞凋亡。代谢性心肌病可能触发氧化应激和细胞凋亡等细胞过程，这些过程可能导致心脏结构和功能的改变。研究揭示，铁死亡可能参与了高脂饮食诱导的大鼠心肌损伤的进程，表明铁死亡可能与代谢性心肌病的代谢紊乱存在关联。

苓桂术甘汤（LGZGD）乃源自《金匮要略》的中医经典方剂，具备祛湿之效，能够温阳化饮、健脾利湿。该方由茯苓、桂枝、白术及甘草四味药材构成。先前的研究成果揭示，LGZGD能够通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路对大鼠急性心肌梗死后的左心室重塑产生积极影响，并且通过NRF2介导的机制减轻由阿霉素引起的心肌损伤。尽管如此，对于其在代谢性疾病方面的研究尚显不足。

近日，一篇名为“Exploring the mechanism of Ling-Gui-Zhu-Gan decoction in metabolic cardiomyopathy via inhibiting ferroptosis”的文章阐释了LGZGD通过抑制铁死亡调控代谢性心肌病的机制。

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LGZGD改善了心功能、脂质和血清酶指标

大鼠心功能及多项生化指标检测显示，模型组大鼠心脏重量与体长比值（HW/TL）上升（P<0.05），而辛伐他汀（SIM）组和LGZGD组的HW/TL显著下降（P<0.05）。模型组大鼠的射血分数（EF）和分数缩短（FS）显著低于LGZGD组（P<0.01），而SIM组的左心室内径舒张末期（LVIDd）和收缩末期（LVIDs）显著高于LGZGD组（P<0.05）。模型组大鼠血清中的TC、TG、LDL、CK、NT-proBNP水平显著升高（P<0.01），而HDL水平显著降低（P<0.01）（图2）。经SIM和LGZGD治疗后，上述指标均显著恢复。

图2 LGZGD可改善心功能、脂质和血清酶指标

LGZGD改善了病理改变

HE结果显示，模型组心肌细胞肥大伴随空泡性病变，而SIM和LGZGD的干预，这些病变均有所缓解。Masson染色结果表明，模型组的胶原沉积显著，但在SIM和LGZGD的干预下，胶原纤维沉积情况得到了改善。油红O染色结果显示，LGZGD组的心肌脂质沉积显著增加，而心肌脂质沉积则显著减少（图3）。

图3 LGZGD可改善代谢性大鼠心肌结构损伤

LGZGD改善了脂质代谢异常

WB结果显示，模型组PLIN5和CD36蛋白的表达量有所上升。LGZGD处理后，这些蛋白的表达量显著降低，这一发现与qRT-PCR及免疫组织化学分析的结果相吻合。进一步观察发现，模型组中ATGL蛋白的表达量低于对照组，尽管这种差异在统计学上并不显著。然而，LGZGD处理后，ATGL蛋白的表达量显著增加，这一点也得到了qRT-PCR和免疫组织化学分析的证实（图4）。

图4 LGZGD可改善脂质代谢异常

LGZGD可改善模型大鼠的线粒体损伤

电子显微镜观察心肌组织中线粒体的超微结构显示，心肌组织内的线粒体体积和数量有所减少，外膜出现破裂，且峭结构减少或消失。模型组肌原纤维的排列呈现紊乱状态，经过8周的LGZGD干预，LGZGD组心肌组织的线粒体损伤有所减轻，肌原纤维的排列也得到了恢复。研究还利用qRT-PCR技术，对DRP1、MFF、FIS1和OPA1等基因的表达水平进行了检测。结果显示，模型组中DRP1、MFF、FIS1的信使核糖核酸（mRNA）水平显著上升，而OPA1的水平则显著下降。LGZGD干预后，上述基因的表达水平出现了明显的逆转。此外，模型组中丙二醛（MDA）水平升高，超氧化物歧化酶（SOD）水平降低（P<0.05，P<0.01）。LGZGD治疗8周后，MDA水平显著降低，SOD水平显著升高（P<0.05）（图5）。

图5 LGZGD可改善模型大鼠的线粒体损伤

LGZGD改善铁死亡

为验证LGZGD对代谢性心肌病中铁代谢相关蛋白表达的影响，研究运用了WB、qRT-PCR以及免疫组织化学技术，对GPX4、ACSL4和FPN1的表达进行了检测。WB结果表明，LGZGD显著提升了GPX4和FPN1蛋白的表达水平，并降低了ACSL4蛋白的表达。qRT-PCR结果显示，经过LGZGD处理后，GPX4、ACSL4和FPN1的mRNA表达水平均显著回升。免疫组织化学结果显示，LGZGD干预后，GPX4和FPN1蛋白水平呈现上升趋势，而ACSL4蛋白水平则呈现下降趋势（图6）。

图6 LGZGD改善铁死亡

LGZGD调节心肌细胞脂质代谢异常

PA组PLIN5和CD36的表达量显著增加（P<0.05，P<0.01），而ATGL的表达量则显著减少（P<0.05，P<0.01）。在LGZGD组中，PLIN5、CD36和ATGL的表达模式发生了显著的逆转（P<0.01）。此外，PA组中GPX4和FPN1的表达量显著下降（P<0.05，P<0.01），而ACSL4的表达量则显著上升（P<0.01）。LGZGD和Fer-1能够逆转这些表达变化（图7）。

图7 LGZGD调节心肌细胞脂质代谢异常

结论

综上所述，LGZGD显著改善了代谢性心肌病模型大鼠和PA诱导的心肌细胞损伤模型中的脂质代谢紊乱和铁死亡。通过调节PLIN5介导的铁死亡途径，抑制了由心肌细胞脂质代谢异常引发的铁死亡，从而改善了代谢性心肌病引起的心脏和结构功能损伤。

参考文献：

Zhao CZ, Ding HM, Hu ZQ, Zhou L, Du YQ, Zhou P, Wang L. Exploring the mechanism of Ling-Gui-Zhu-Gan decoction in metabolic cardiomyopathy via inhibiting ferroptosis. Phytomedicine. 2024 Nov 9;135:156234. doi: 10.1016/j.phymed.2024.156234

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