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交叉配血试验又称血液相容性试验,是确保患者安全输血必不可少的试验。交叉配血主要是检查受血者与供血者血液之间有没有相应的抗原-抗体反应,包括主侧与次侧配血。
使用受血者血清(血浆)加供血者红细胞的一管称为“主侧”,
使用供血者血清(血浆)加受血者红细胞的一管称为“次侧”。
临床意义
在血型鉴定的基础上,通过交叉配血试验进一步证实受血者和供血者之间不存在血型不合的抗原一抗体反应,以保证受血者的输血安全。因输血直接涉及病人的生命安全,故病人与献血员虽属同一血型也应进行交叉配血。
交叉配血是确定能否输血的重要依据,两侧均不凝集可输血。若献血人红细胞与受血人血清(主侧)发生凝集应禁止输血;主侧不凝集,次侧(献血人血清与受血者红细胞)凝集,必要时可少量、慢速输血。
交叉配血不能只进行盐水介质交叉配血,在基层实验室也应该有其他介质的交叉配血试剂,以尽量消除不完全抗体存在的危害,减少输血引起的不良反应。
主要方法
一、盐水介质交叉配血试验
【原理】
红细胞上携带有ABO抗原,当和相应的抗体结合(如A型红细胞遇到含有抗A的B型血清)之后,就会产生肉眼可见的凝集。所以当受血者和供血者细胞经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来,所以常称为“立即离心”(immediate spin , IS) 配血试验。用来检测供者红细胞与受血者血清之间的ABO相容性。
二、抗人球蛋白交叉配血试验
【原理】
一些针对红细胞上血型抗原的IgG类不完全抗体,结合到红细胞上之后,必须通过抗人球蛋白试剂的连接,才能形成肉眼可见的凝集。当供血者或受血者血液中存在相应的不规则抗体时,可能会导致迟发型溶血反应的发生。所以,抗人球蛋白交叉配血试验常用来检测IgG抗体引起的不相容性。抗人球蛋白介质交叉配血可以使用试管法、微柱凝胶法来进行。
三、凝聚胺法交叉配血试验
【原理】
凝聚胺试验( polybrene )使用低离子介质(low ionic medium , LIM) 加速IgG抗体与红细胞之间的反应速度。凝聚胺作为一种碱性分子可以和红细胞表面的酸性糖分子结合,在离心力的作用下凝聚胺使红细胞相互靠近,使得已经结合在红细胞表面IgG抗体分子可以在不同的红细胞之间搭桥。然后加入重悬液,使得凝聚胺的作用被消除。被凝聚胺凝集起来的红细胞,此时会渐渐散开,但已经被IgG抗体分子搭桥连接起来的红细胞不会散开,以此检测血清或血浆中存在的血型抗体。本试验具有敏感性高及快速等优点,已应用于血型检查、抗体筛选和鉴定、交叉配血试验。
三、微柱凝胶交叉配血试验
【原理】
在一个微小的柱子中,填充球形的凝胶颗粒,凝胶颗粒之间有缝隙,红细胞具有一定的变形能力,在一定力的作用下能通过缝隙。红细胞与相应抗体在凝胶柱上方反应,然后通过离心给一个向下的力,如果有抗原抗体结合,红细胞凝集成团块,就无法通过缝隙,被凝胶阻拦在凝胶表面或者凝胶中部。如果没有抗原抗体的反应,红细胞还是分散的,在离心力下通过凝胶间隙,到达微柱凝胶的底部。以此来区分是否发生了抗原抗体的反应,从而用已知抗原检测抗体,或者用已知抗体检测抗原。
总结
盐水法交叉配血简单、方便、快速,但不能检出不完全抗体引起的交叉配血不配合。而且盐水法对于操作人员的操作技能与专业判断能力有一定的要求。有一定几率会导致试验结果出现假阴性。
试管法抗球蛋白介质交叉配血是一种安全可靠的交叉配血方法。在盐水法的基础上,抗人球蛋白介质增加了对不完全抗体(IgG抗体)引起的检测。但试管法抗球蛋白介质交叉配血试验操作复杂、时间长,很难应用于紧急配血试验。同样对于操作人员的操作技能与专业判断能力有一定的要求。
微柱凝胶法能对微弱的抗原或抗体进行反应,大大提高了试验的敏感度,便于自动化、标准化,重复性好,结果稳定,结果观察直观。但孵育、离心时间较长,不适用于特别紧急的配血。因此,试管法和微柱凝胶法两者可结合使用,同时保障检测时效和安全水平。
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