人类基因组的复杂性令人叹为观止，但仅约1%的基因编码约两万种蛋白质，而其中被深入研究的仅有几千种，被认为具有作为药物或检测靶点的更是屈指可数。陆续有研究表明，人类基因组中曾被认为不具备编码功能的非编码区，同样蕴藏着编码蛋白质的潜力。这些如同“暗物质”般神秘的未被充分研究蛋白质，可能蕴藏着治疗包括癌症在内多种疾病的关键钥匙，其系统鉴定将为生物学与医学研究带来新思路。 

近期，林爱福与周天华团队在人类胃癌等组织样本中鉴定出近万个尚未被充分解析的新型微肽，并借助人工智能技术对其功能进行了系统注释，为肿瘤等恶性疾病的预防和干预提供了新的靶点和思路。相关论文Comprehensive Discovery and Functional Characterization of the Noncanonical Proteome于2025年3月14日作为封面报道（Cover Story）发表于Cell Research杂志1。同期的研究点评中，来自德国马克斯·德尔布吕克分子医学中心的基因组学专家Norbert Hübner教授对该项工作做出高度评价，这项研究挑战了传统的编码与非编码基因的二元划分，展示了非经典蛋白质组在癌症生物学研究中的巨大潜力。

上述前期发现为微肽功能解析提供了相关理论与技术支撑。研究者们进一步聚焦于肝癌相关微肽，并对其作为天然抗肿瘤药物的潜力进行深入挖掘。2025年6月19日，浙江大学林爱福、周天华及袁瑛等团队在Molecular Cell 杂志在线发表题为Hepatic micropeptide modulates mitochondrial RNA processing machinery in hepatocellular carcinoma的封面文章。该研究鉴定了肝癌组织来源的微肽并进行了系统功能注释，揭示了线粒体微肽MRPIP响应能量应激，调控线粒体内功能复合体组装和能量代谢，从而抑制肝癌增殖的功能，并据此发现了肝癌天然微肽类靶向药物前体分子。

研究者首先采用超滤浓缩串联质谱技术，从肝癌临床样本中鉴定得到1532个新型微肽，并开发了一个基于Alphafold2结构预测和肽-蛋白质互作网络的功能预测模型，对微肽进行了系统功能注释。分析揭示微肽广泛分布于各种亚细胞结构中，具有与蛋白复合体结合、组装和调控相关的潜在生物学功能。进一步通过公共数据库筛选和临床样本分析，发现lncRNA AC027045.3 编码的微肽MRPIP在肝癌组织中表达显著下调并与不良预后显著相关，进一步细胞定位分析，发现微肽MRPIP位于线粒体基质。

肝脏作为人体内线粒体含量和密度最高的器官之一，线粒体功能异常与肝癌发生发展密切相关。线粒体作为半自主细胞器，拥有独立的基因组以及基因表达系统。不同于核编码RNA，线粒体RNA（mtRNA）以多顺反子的形式转录，当tRNA从初级转录物上被剪切分离后，剩余的片段即被加工为mRNA和rRNA。因此前体mtRNA的剪切过程决定了线粒体mRNA的可用性，对线粒体基因表达产生重要影响²。在增殖活跃的肝癌肿瘤细胞中，线粒体基因表达系统高度激活，然而尚不清楚这一过程是否涉及mtRNA剪切的异常调控。深入研究mtRNA剪切过程在肝癌进展中的作用和调控机制，有望为肝癌线粒体靶向治疗提供理论基础。

研究者通过进一步质谱筛选鉴定及非变性电泳分析，发现MRPIP结合线粒体RNA剪切复合体mtRNase P的亚基HSD17B10，破坏其四聚化及其与另一亚基TRMT10C的结合。MRPIP介导的mtRNase P复合物组装抑制，并进一步导致线粒体RNA加工、蛋白翻译和能量代谢受到干扰，最终抑制肿瘤增殖。生物大分子的合成与细胞能量供应高度相适。通过ChIP-qPCR 检测和一系列敲除回补实验，研究者证明转录因子FOXO1在葡萄糖饥饿条件下转录上调MRPIP，从而抑制mtRNase P的组装和活性，下调线粒体翻译。以上研究揭示MRPIP响应能量应激，抑制线粒体翻译的节点调控功能。

基于上述功能机制解析，研究者基于微肽MRPIP的功能结构域设计合成了20个氨基酸的微肽药物前体分子PMHR。借助体外肿瘤细胞模型及体内小鼠肝癌模型，证明PMHR可不依赖于递送载体进入肿瘤细胞线粒体，通过靶向mtRNase P抑制线粒体翻译和能量代谢，有效抑制了肝癌恶性进程。综上，本研究系统鉴定并注释了肝癌相关微肽，发现了微肽作为细胞内蛋白复合体调控元件的生物学功能，揭示微肽作为内源性生物活性小分子，为肿瘤靶向药物的开发提供新策略和新思路。

本研究鉴定得到的微肽与团队前期研究成果均收录于团队自主构建的可访问的可视化数据集：人类微肽谱图（Human Micropeptide Atlas, HMPA），并于2024年9月23日以题为HMPA: A Pioneering Framework for the Noncanonical Peptidome from Discovery to Functional Insights的数据库发表于Briefings In Bioinformatics³。通过对公共数据库中的蛋白质组数据和自测数据的从头分析，该数据集还包含从包括乳腺癌、肾透明细胞癌等8类癌种中鉴定到的约2万个非编码RNA来源的微肽，并将临床大数据中的预后、表达等作为特征值纳入整合分析。该数据库可通过hmpa.zju.edu.cn访问，后续将持续更新，将为微肽研究提供便捷、多维的可视化工具，为精准医学和后基因组治疗提供数据支持。

浙江大学林爱福教授、周天华教授、袁瑛教授为本论文的通讯作者。浙江大学诸林瑜、刘方舟、石成瑜与苏心婉为本论文的共同第一作者。研究工作也得到了浙江大学丁克峰教授、西湖大学李旭教授等合作者的大力支持。该团队欢迎对RNA生物医学、肿瘤生物学等方向感兴趣的青年才俊加盟（提供博士后及特聘研究员、副研究员等岗位）。

参考文献

1.Shi, C. et al. Comprehensive discovery and functional characterization of the noncanonical proteome. Cell Res35, 186-204 (2025).

2.Kummer, E. & Ban, N. Mechanisms and regulation of protein synthesis in mitochondria. Nat Rev Mol Cell Biol22, 307-325 (2021).

3.Su, X. et al. HMPA: a pioneering framework for the noncanonical peptidome from discovery to functional insights. Brief Bioinform25 (2024).

Tags： Cell Res：林爱福等解码肝癌微肽组并开发新型微肽类靶向药物前体