近年来，细胞免疫治疗因其靶向杀伤肿瘤细胞的能力，成为肿瘤治疗领域的研究热点。其中，嵌合抗原受体自然杀伤细胞（CarNK）因其识别肿瘤特异性抗原并释放穿孔素-颗粒酶B（perforin-granzyme B）诱导肿瘤细胞凋亡，展现出巨大临床潜力。如何实时、无创地监测CarNK细胞在体内的动态分布、活性及疗效，成为当前转化医学的重要挑战。

近期，在2025年第38届欧洲核医学协会年会(EANM)  上，由华中科技大学同济医学院团队开展的一项利用[68Ga]Ga-NOTA-GZP正电子发射断层显像（PET）技术的研究，实现了Granzyme B活性的精准成像，开拓了CarNK细胞追踪与疗效预测的新路径。

本研究采取了体外与体内相结合的多层次实验设计，系统验证了CarNK细胞的抗肿瘤效能及PET影像的应用价值。研究人员使用携带EGFRvIII突变的非小细胞肺癌细胞系A549EGFRvIII+作为靶细胞，和经基因工程改造的CarNK92细胞共培养。通过乳酸脱氢酶（LDH）释放量检测和CCK-8细胞活性试验，量化了CarNK细胞的细胞毒性；流式细胞术检测其表面CD107a表达，评估细胞激活状态。结果显示，CarNK细胞在5:1效应靶标比（E:T）时细胞毒性明显优于野生型NK92细胞（P<0.05），激活指标CD107a表达比例达到21.7%，显著高于对照组，证明了CarNK的高效杀瘤能力。

动物模型建立及PET成像应用

针对体内动态追踪，研究构建了两类小鼠模型：1. Balb/c裸鼠皮下同时注射CarNK与A549EGFRvIII+细胞的混合物，按不同比例（1:1至1:5）进行，进行[68Ga]Ga-NOTA-GZP PET/CT扫描，观察Granzyme B表达与细胞比例的相关性。2. SCID NOD小鼠体内种植A549EGFRvIII+肿瘤，并在肿瘤形成后输注CarNK细胞，分别于治疗后第1、3、7、12天进行PET扫描，动态监测CarNK细胞的浸润与活性，并结合生存数据进行统计学分析。

关键发现：成像兼具定量与预后价值

PET影像揭示，Balb/c裸鼠中CarNK与肿瘤细胞比例越高，放射性示踪剂的肿瘤摄取越显著（P<0.05），表明Granzyme B活性与CarNK数量直接相关。在SCID NOD小鼠中，第7天的肿瘤与血液标准摄取比（T/B比）达到最大，CarNK组较传统NK92组高出1.56倍，显示细胞活性及肿瘤杀伤效果更优。生存分析显示，高放射性摄取组中位生存期显著延长，证实PET成像信号与治疗效果高度相关（P<0.05）。

技术优势与应用前景

利用[68Ga]Ga-NOTA-GZP进行Granzyme B靶向PET成像，具备多重优势： - 无创性：实现CarNK细胞体内行为的实时追踪，避免传统组织活检创伤。 - 高灵敏度与特异性：准确反映Granzyme B的释放与CarNK杀伤活性，提供动态功能信息。 - 预后预测力强：可作为免疫细胞治疗疗效的早期生物标志物，指导个体化治疗调整。 这一成像策略为ACT疗效监测提供了全新的技术手段，尤其适用于肿瘤免疫治疗中动态评估细胞疗法的临床转化研究。

挑战与未来方向

尽管该研究取得突破，仍面临一些技术与临床应用难点：药物示踪剂的体内稳定性及安全性需进一步优化与确认。不同肿瘤类型与免疫环境下CarNK细胞功能差异，需拓展多样化模型验证。PET设备的普及与成本问题，限制了广泛临床应用的推广。 未来研究可结合多模态成像技术，整合分子与功能信息，同时引入人工智能辅助影像分析，提升诊断与预后预测的精准度。此外，更多来自临床的多中心大样本数据，将推动该技术的规范化和标准化。

参考资料

Granzyme B-Targeted PET Imaging Enables CarNK Cell Tracking and Prognosis Prediction in Adoptive Immunotherapy

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Tags： EANM 2025：中国之声 | Granzyme B靶向PET成像，开创CarNK细胞追踪与免疫治疗疗效预测新时代