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原理
血细胞内的α- 醋酸萘酚酯酶(α-naphythyol acetate esterase,α-NAE)在pH中性的条件下水解基质液中的α- 醋酸萘酚,释放出α-萘酚,进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀,定位于细胞质内酶所在的部位。
本试验常用的重氮盐为坚牢蓝B,形成的有色沉淀为棕黑色或灰黑色。α-NAE存在于单核细胞、粒细胞和淋巴细胞中,故它是一种中性非特异性的酯酶。单核系细胞的阳性可被氟化钠抑制,所以做α-NAE染色时,通常同时做氟化钠抑制试验。
正常血细胞的染色反应
1.单核细胞系统
分化差的原单细胞呈阴性,分化好的原单细胞呈阳性(常较强),幼稚及成熟的单核细胞也呈阳性,单核系细胞的阳性反应能被氟化钠抑制。
所谓抑制是指氟化钠试验的抑制率大于50%,抑制率的计算公式为:氟化钠抑制率 =(抑制前阳性率或阳性积分-抑制后阳性率或阳性积分)除以(抑制前阳性率或阳性积分)×100%。
2.粒细胞系统
各期粒细胞阴性,有时少数粒细胞呈弱阳性,阳性反应不能被氟化钠抑制。
3.淋巴细胞系统
各期淋巴细胞多数阴性,少数弱阳性,阳性反应不能被氟化钠抑制。
4.其他细胞
巨核细胞和血小板呈阳性,阳性反应不能被氟化钠抑制;幼红细胞大多数阴性,少数呈弱阳性,阳性反应不能被氟化钠抑制;浆细胞呈阴性。
临床意义
α-NAE染色是一种非特异性酯酶染色。非特异性酯酶染色是急性白血病的常规细胞染色。
1.主要用于辅助鉴别急性白血病细胞类型。
①急性单核细胞白血病时单核系细胞大多数呈阳性,阳性反应能被氟化钠抑制;
②急性粒细胞白血病时原粒细胞呈阴性或阳性,阳性反应不能被氟化钠抑制;
③急性早幼粒细胞白血病时早幼粒细胞呈强阳性,阳性反应不能被氟化钠抑制;
④急性淋巴细胞白血病:原始及幼稚淋巴细胞呈阴性或阳性,阳性反应不能被氟化钠抑;
⑤急性粒-单细胞白血病:原粒细胞呈阴性至阳性,阳性反应不被氟化钠抑制;原始及幼稚单核细胞呈阳性,单核系细胞阳性反应能被氟化钠抑制。
但有时单核系细胞或粒系细胞、淋系细胞阳性较弱,因此加氟化钠后的抑制情况难以判断,且有时阳性细胞是由于假阳性所致。
2.红血病和红白血病:异常幼红细胞可呈阳性,阳性反应不能被氟化钠抑制。
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