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新冠病毒感染与免疫调节

来源 2023-01-12 18:02:40 医疗资讯

随着第一波疫情高峰的褪去,很多阳康的同学也陆续恢复正常的学习和生活。在此期间为了确定自己是否中招,同学们大多进行了抗原和核酸检测。那么核酸和抗原检测的原理是什么样呢?新冠病毒感染与感冒、流感又有哪些区别呢?下面我们做个简单介绍。

1.致病的病原体不同

在症状表现上,感冒、流感和新冠病毒感染可能都会出现发热、咳嗽、头痛等症状,但这三种疾病是由不同病毒引起的:

感冒:一般由细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次氏体等病原微生物所引起,其中病毒大多为鼻病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等。

流感:由流感病毒引起。流感病毒属正粘病毒科,为单股、负链、分节段RNA病毒。根据核蛋白和基质蛋白不同,分为甲、乙、丙、丁四型。目前感染人的主要是甲型流感病毒中的H1N1、H3N2亚型及乙型流感病毒中的Victoria和Yamagata系。

新冠病毒感染:由“2019新型冠状病毒(2019-nCoV)”引起。2019-nCoV是已知的第7种可以感染人的冠状病毒,其余6种分别是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV(引发重症急性呼吸综合征)和MERS-CoV(引发中东呼吸综合征)。

2.核酸、抗原检测是针对病毒进行的

⑴核酸检测:核酸是脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的总称,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。而病毒核酸检测也正是依据这一原理进行的,利用每种病毒的核酸是不一样的原理,来对病毒独特的基因序列进行检测。

检测病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR(聚合酶链式反应)。因PCR反应模板仅为DNA,因此在进行PCR反应前,应将病毒核酸(RNA)逆转录为DNA。在PCR反应体系中,包含一对特异性引物以及一个Taqman探针,该探针为一段特异性寡核苷酸序列,两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;如反应体系存在靶序列,PCR反应时探针与模板结合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解,报告基团与淬灭基团分离,发出荧光。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数(Ct值)与病毒核酸浓度有关,病毒核酸浓度越高, Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。

原理:在做核酸检测时,检测仪器需要把病毒样本基因放大到一定程度才能侦测到病毒。如咽拭子鼻拭子取样,只要样品中含有RNA(如低到10-12的摩尔浓度),然后用PCR仪器体外扩增就行了。

第n轮扩增就是2的n次方,这儿的n其实就是所谓的Ct值,全名叫Cycle threshold,即循环数阈值,在核酸检测中是个很重要的概念,n的大小,决定了扩增多好轮病毒RNA,扩增的的次数也多,RNA的量越大越能引起荧光反应(在PCR反应体系中加入荧光物质)。即病毒核酸浓度越高,荧光强度越高,循环阈值ct越小。

新型冠状病毒核酸检测时,Ct值是判断核酸检测阳性的标准,可称为循环阈值(如图)。

检测仪器对采集的标本进行核酸检测时,需要让核酸翻倍(即扩增,通过PCR技术),Ct值表示的就是翻了多少倍。一般情况下,新型冠状病毒核酸检测Ct值越大,说明需要较多的循环数才能扩增出新型冠状病毒,意味着病毒的含量越少。新型冠状病毒核酸检测Ct值越小,需要扩增的循环数越少,说明病毒的含量越高。

新型冠状病毒核酸检测Ct值≥35(原先规定是>40),说明体内病毒含量较少或者没有病毒存在,基本没有传染性。无Ct值或者Ct值≥35,当然无Ct值很好理解,就是我无论怎么扩增都没有病毒,因为这个人压根没感染病毒,对于Ct值≥35,就是说如果核酸检测中发现了荧光阳性,但是此时是循环扩增了35代以上,那其实也可以归位阴性,因为此刻病毒载量太小,荧光原因是由于体外扩增太多而引起的。如果新型冠状病毒核酸检测Ct值<35,说明体内病毒的含量较多,通常为阳性,具有较强的传染性,需要进行隔离,以减少疾病的传播。

但有些时候,会出现假阴性,如:

病毒入侵人体初期,人体内病毒量尚未达到可检测的程度。在病毒潜伏期、轻度症状、严重症状的不同时期,人体的不同部位(如鼻咽部、口咽部、气管、支气管和肺泡)的病毒载量会存在差异。所以,采样时机和采样部位的不同,可能导致所采集的标本中没有足够量的病毒;

任何检测试剂都有其检测下限(即敏感性),如果患者标本内的病毒达不到所使用试剂的检测下限,则会出现假阴性;

实验室仪器设备性能和人员检测能力差、质量管理落实不到位等也会产生假阴性;

采样不规范、采集部位不当、采集标本不典型,导致标本中被病毒感染的细胞太少或没有。即可能造成假阴性。

⑵抗原检测:抗原检测是对标本里是否有病毒的蛋白成分进行检测,通过抗原和抗体结合反应在试纸条上检测,一般检测的是N蛋白,N蛋白是病毒的核衣壳蛋白,如果标本中有新冠病毒N蛋白,就会和检测板里的特异性抗体结合,然后让检测线显色。

通过以上我们可以得知,无论是核酸检测还是抗原检测,针对的都是新冠病毒的基因特性。二者的主要区别是:

检测原理不同:抗原检测是利用带有抗体,并且可以发生独特生化反应的试纸进行检测,主要是通过鼻腔采集标本。而核酸检测则是通过荧光定量PCR,对病毒的独特序列RNA进行扩增检测,可以通过鼻拭子、咽拭子等方式采集标本;

  检测地点不同:抗原检测一般是可自行在家操作检测,而核酸检测则需要到当地指定医疗机构,由专业人员进行标本采集;

  检测速度不同:抗原检测一般速度较快,一般15分钟便可以明确检测结果。而核酸检测方法比较复杂,出检测结果的速度较慢,最快可能也需要3-4个小时;

  结果准确性不同:抗原检测一般比较容易受外界因素影响,而出现假阳性反应。而核酸检测的灵敏度较高,因此其准确性较抗原检测高。

阳性结果:“C”和“T”处均显示出红色或紫色条带, “T”处条带颜色可深可浅,均为阳性结果。

阴性结果:“C” 处显示出红色或紫色条带,“T” 处未显示条带。

无效结果:“C” 处未显示出红色或紫色条带,无论“T”处是否显示条带。结果无效,需重新取试纸条重测。

结束语:同学们!即使您“阳康”了,也不要掉以轻心,学以致用!请做好日常防护,守护好自己及家人!预防二次感染!

Tags: 新冠病毒感染与免疫调节  

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